Окраска по Граму: как ее делают и для чего

Содержание

• Как делается окраска по Граму
• Для чего это

Окрашивание по Граму, или просто по Граму, - это быстрый и простой метод, направленный на дифференциацию бактерий в соответствии с характеристиками их клеточной стенки после воздействия различных красителей и растворов.

Таким образом, с помощью окрашивания по Граму можно проверить, помимо формы бактерий, цвет, который они приобретают, и этот результат важен для определения других стратегий определения видов бактерий и для врача, чтобы указать профилактическое лечение. по характеристикам, наблюдаемым под микроскопом.

Окрашивание по Граму обычно проводится в лаборатории и является частью бактериоскопического исследования. Разберитесь, что такое бактериоскопия и как ее проводят.

Как делается окраска по Граму

Окраска по Граму - это быстрый, практичный и недорогой метод выявления бактерий, ответственных за инфекции, который может быть полезен врачам для определения профилактического лечения инфекции, которая может возникнуть, поскольку известны конкретные характеристики этих групп бактерий,

Окрашивание по Граму выполняется в 7 основных этапов, однако протокол может варьироваться в зависимости от лаборатории:

1. Поместите несколько колоний бактерий на предметное стекло, добавив каплю воды, чтобы облегчить гомогенизацию колоний;
2. Дайте ему немного высохнуть, и лезвие сможет быстро пройти сквозь пламя, чтобы способствовать высыханию, однако важно обращать внимание на температуру, поскольку при слишком высокой температуре возможно изменение структуры материала. бактерии, которые могут помешать результату обследования;
3. Когда слайд высохнет, накройте его фиолетовым кристаллическим красителем и дайте ему подействовать примерно на 1 минуту;
4. Промойте предметное стекло струей проточной воды и покройте предметное стекло люголем, который фиксирует синий краситель, и дайте ему подействовать в течение 1 минуты. Оба типа бактерий могут поглощать комплекс, образованный красителем и люголем, становясь синим;
5. Затем промойте предметное стекло проточной водой и нанесите 95% спирт, оставив действовать на 30 секунд. Спирт отвечает за растворение липидной мембраны, которая образует грамотрицательные бактерии, и, таким образом, за удаление комплекса, образованного между красителем и люголем, обесцвечивающего эти бактерии. Однако в случае грамположительных бактерий алкоголь обезвоживает клеточную стенку грамположительных бактерий, вызывая сужение пор и делая их непроницаемыми;
6. Затем снова промойте в проточной воде и покройте предметное стекло вторым красителем, фуксином или сафранином и дайте ему подействовать в течение 30 секунд;
7. Затем промойте предметное стекло под проточной водой и дайте ему высохнуть при комнатной температуре.

Как только предметное стекло высохнет, можно нанести каплю иммерсионного масла и наблюдать предметное стекло под микроскопом с 100-кратным объективом, что позволяет проверить наличие или отсутствие бактерий, а также наличие дрожжевых грибков и эпителиальных клеток. клетки.

Для чего это

Окрашивание по Граму имеет основную цель - дифференцировать бактерии в соответствии с характеристиками клеточной стенки и общей морфологией. Таким образом, по характеристикам, наблюдаемым под микроскопом, бактерии можно разделить на:

• Грамположительные бактерии, которые визуализируются синим цветом из-за того, что они не обесцвечиваются спиртом, так как имеют более толстую клеточную стенку и их поры сужаются при воздействии люголя;
• Грамотрицательные бактерии, которые визуализируются с розовым / пурпурным цветом из-за того, что они обесцвечиваются спиртом и окрашиваются сафранином или фуксином.

После просмотра бактерий под микроскопом, возможно, в лаборатории будут проведены дальнейшие тесты для определения вида бактерий. Тем не менее, с помощью Грама и ассоциации с признаками и симптомами, представленными человеком, врач может указать профилактическое лечение до тех пор, пока не будут получены результаты более конкретных исследований, поскольку таким образом можно снизить скорость размножения бактерий и предотвратить осложнения.