Электрофорез: что это такое, для чего он нужен и как это делается

Содержание

• Для чего это
• Как это делается
• Виды электрофореза
• 1. Электрофорез гемоглобина.
• 2. Белковый электрофорез.

Электрофорез - это лабораторный метод, выполняемый с целью разделения молекул в зависимости от их размера и электрического заряда, чтобы можно было поставить диагноз, проверить экспрессию белка или идентифицировать микроорганизмы.

Электрофорез - это простая и недорогая процедура, которая используется в лабораторных условиях и в исследовательских проектах. В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение других тестов и обследований, например, для постановки диагноза.

Для чего это

Электрофорез можно проводить для разных целей, как в исследовательских проектах, так и в диагностике, поскольку это простой и недорогой метод. Таким образом, электрофорез можно проводить, чтобы:

• Выявление вирусов, грибков, бактерий и паразитов, это приложение чаще используется в исследовательских проектах;
• Тест на отцовство;
• Проверить экспрессию белков;
• Выявление мутаций, которые могут быть полезны, например, при диагностике лейкемии;
• Проанализировать типы циркулирующего гемоглобина, полезные при диагностике серповидно-клеточной анемии;
• Оцените количество белков в крови.

В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение дополнительных тестов, чтобы врач мог завершить диагностику.

Как это делается

Для проведения электрофореза требуется гель, который может быть полиакриламидом или агарозой в зависимости от назначения, буфер для электрофореза и ванна, маркер молекулярной массы и флуоресцентный краситель, в дополнение к оборудованию для УФ- или светодиодной подсветки, также известному как трансиллюминатор.

После приготовления геля необходимо поместить специальный предмет так, чтобы лунки были сделаны в геле, обычно называемом гребнем, и дать гелю застыть. Когда гель будет готов, просто нанесите вещества в лунки. Для этого в одну из лунок необходимо поместить маркер молекулярной массы, положительный контроль, представляющий собой известное вещество, отрицательный контроль, гарантирующий достоверность реакции, и образцы для анализа. Все образцы должны быть смешаны с флуоресцентным красителем, так как таким образом можно визуализировать полосы на трансиллюминаторе.

Гель с образцами должен быть помещен в чан для электрофореза, который содержит определенный буферный раствор, а затем устройство включено, чтобы появился электрический ток и, следовательно, разность потенциалов, которая важна для разделения частиц в соответствии с их загрузка и размер. Время электрофоретической обработки зависит от цели процедуры и может длиться до 1 часа.

По истечении указанного времени можно просмотреть результат электрофоретического прогона через трансиллюминатор. Когда гель помещается под УФ или светодиодный свет, можно визуализировать картину полос: чем больше молекула, тем меньше ее миграция, приближаясь к лунке, а чем легче молекула, тем больше миграционный потенциал.

Чтобы реакция была подтверждена, полосы положительного контроля должны быть визуализированы, и ничего не должно визуализироваться в отрицательном контроле, поскольку в противном случае это указывает на наличие загрязнения, и весь процесс должен быть повторен.

Виды электрофореза

Электрофорез можно проводить для различных целей, и в соответствии с его назначением можно использовать несколько типов гелей, наиболее распространенными из которых являются полиакриламид и агароза.

Электрофорез для идентификации микроорганизмов чаще проводится в исследовательских лабораториях, однако в диагностических целях электрофорез может использоваться для выявления гематологических заболеваний и заболеваний, которые развиваются с увеличением количества белков, являясь основными типами электрофореза:

1. Электрофорез гемоглобина.

Электрофорез гемоглобина - это лабораторный метод, выполняемый для определения различных типов гемоглобина, циркулирующих в крови, что позволяет определить наличие заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина. Тип гемоглобина определяется с помощью электрофореза при определенном pH, в идеале от 8,0 до 9,0, с рисунком полос, который можно сравнить с нормальным рисунком, что позволяет идентифицировать аномальные гемоглобины.

Для чего это сделано: Электрофорез гемоглобина проводится для исследования и диагностики заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина, таких как серповидноклеточная анемия и болезнь гемоглобина C, в дополнение к тому, что он полезен для дифференциации талассемии. Узнайте, как интерпретировать результаты электрофореза гемоглобина.

2. Белковый электрофорез.

Электрофорез белков - это обследование, которое требует врач для оценки количества белков, циркулирующих в крови, и, таким образом, для выявления заболеваний. Это исследование проводится на основе образца крови, который центрифугируется для получения плазмы, части крови, состоящей, среди прочего, из белков.

После электрофореза можно визуализировать рисунок полос и, впоследствии, график, на котором указано количество каждой фракции белков, что является основополагающим для диагностики.

Для чего это сделано: Электрофорез белков позволяет врачу исследовать возникновение множественной миеломы, обезвоживания, цирроза, воспаления, заболевания печени, панкреатита, волчанки и гипертонии в соответствии с рисунком полос и графиком, представленным в отчете об обследовании.

Разберитесь, как это делается и как понять результат электрофореза белков.